(رنگ آمیزی H&E روش روتین)
مواد لازم :
- هماتوکسیلین هاریس
روش تهیه :
پودر هماتوکسیلین را در۱۰۰ سی سی الکل مطلق حل نموده وآلن دوپتاس را در دولیتر آب مقطرحل میکنیم روی شعله چراغ باید نزدیک جوش باشدتاتمام آلن دوپتاس حل شودوقتی آلن دو پتاس حل شد الکل مخلوط با هماتوکسیلین را بداخل آن ریخته وحرارت میدهیم تانزدیک جوش بعد ۵ گرم اکسید قرمز جیوه را اضافه میکنیم آنوقت به سرعت درداخل آب سردمی گذاریم وسپس آن را صاف می کنیم وقبل از استفاده به نسبت ۴% اسید استیک به آن اضافه میکنیم .
- الکل اسید۱% (۹۹ سی سی الکل ۷۰ درجه رابا۱ سی سی اسید کلریدریک غلیظ)
- کربنات لیتیم ۱%(کربنات لیتیم ۱ گرم در۱۰۰ سی سی آب مقطر)
- اریتروزین ۱%(اریتروزین ۱گرم در۱۰۰ سی سی آب مقطر)
روش رنگ آمیزی
- بافت را بعداز در آوردن از اتو. داخل گزیلل گذاشته تا پارافین زدایی گردد.(توضیح :اگر بافت پارافین داشته باشد رنگ پذیری ندارد و بافت زیر میکروسکوپ بصورت محو دیده میشود )
- الکل ۱۰۰ درجه (تاگزیلل گرفته شود) ۲۰ دقیقه
- الکل ۹۰درجه ( تابافت بتدریج به خودآب بگیرد واماده رنگ پذیری گردد)شستشو
- الکل ۷۰ درجه ( تابافت بتدریج به خودآب بگیرد واماده رنگ پذیری گردد)شستشو
- شستشو با آب مقطر
- هماتوکسیلین ۵ دقیقه ( دراین مرحله هسته رنگ می گیرد)
- شستشو با آب جاری
- الکل اسید ۱% که عمل دیفرانسیه رانیزانجام میدهداضافی رنگ بافت راکم کرده وزمینه برای رنگ سیتوپلاسم آماده می گردد( بافت صورتی کدر می شود)
- کربنات لیتیم که رنگ هسته توسط این ماده قلیایی ثابت شده وازبین نمی رود(بافت آبی شود )
- شستشو با آب مقطر
- اریتروزین سیتوپلاسم دراین مرحله رنگ میگیرد ۳ دقیقه
- شستشوی با آب مقطر
- الکل ۷۰درجه (آب بافت بتدریج گرفته می شود ) شستشو
- الکل ۹۰درجه (آب بافت بتدریج گرفته می شود ) شستشو
- الکل ۱۰۰درجه (بافت کاملا خشک شود) ۵ دقیقه
- گزیلل (الکل بافت گرفته شده وبافت شفاف گردد) ۱۰دقیقه
- مونته کردن (چسباندن لامل روی لام بوسیله چسب بم دوکانادا-اینتالن)
نتیجه :
هسته : بنفش
سیتوپلاسم : صورتی
(روش رنگ آمیزی فروزن سکشن)
ابتدا بعد از برش:
- ۳۰ثانیه آب جاری
- هماتوکسیلین ۳۰ ثانیه
- شستشو با آب مقطر
- کربنات لیتیم ۳۰ثانیه
- ۵-شستشو با آب مقطر
- اریتروزین ۲۰ثانیه
- الکل ۷۰ درجه شستشو
- الکل ۸۰درجه شستشو
- الکل ۱۰۰ درجه شستشو
- گزیلل شفاف کردن
- لامل زدن (مونته کردن )
شما می توانید جهت خرید محصولات پاتولوژی از طریق شرکت نیاز طب با ما در ارتباط باشید :
۰۹۱۵۷۷۸۸۴۶۱
۰۹۹۲۴۸۷۰۰۳۸
ممنونیم که تا آخر این مقاله با ما همراه بودید. امیدواریم توانسته باشیم طی این مقاله شما را با طرز تهیه و روش رنگ آمیزی هماتوکسیلین آشنا کرده باشیم.
میتوانید برای کسب اطلاعات بیشتر درباره آنتی بادی های ایمونوهیستوشیمی به صفحه پاتولوژی ایمونوهیستوشیمی و سیتولوژی مراجعه کنید.را مطالعه کنید.
ما در پیج اینستاگرام مجموعه نیاز طب سلامت، تجهیزات آزمایشگاهی مختلفی را مورد بررسی قرار میدهیم. میتوانید با عضویت در این پیج، اطلاعات خوبی در زمینه تجهیزات آزمایشگاهی کسب کنید.
ما در سایت نیازطب سلامت دستورالعمل تهیه محلول های دیگر پاتولوژی را هم داریم برای خواندن روش تهیه محلول اورانژ یا OG6 روی لینک زیر کلیک کنید.
روش تهیه محلول اورانژ یا OG6