کیتCEA پیشتازطب ۹۶تستی

محتویات کیتCEA پیشتازطب ۹۶تستی:

۱) پلیت ۹۶ خانه حاوی چاهکهای پوشش داده شده با آنتی بادی ضد CEA) Plate Coated CEA-Anti (. ۲) محلول آنزیم کنژوگه (Conjugate Enzyme (: یک ویال حاوی ۱۲ میلی لیتر (آماده مصرف) . ۳) سری استانداردها (Set Standard (: شامل ۶ ویال استاندارد با غلظتهای ۰‚ ۲‚ ۵ ‚ ۲۰ ‚ ۵۰ ‚ ۱۰۰ ml/ng CEA کالیبره شده در مقابل استاندارد۱۶۰۱ / ۷۳ IRP WHO) استاندارد صفر حاوی ۲ میلی لیتر و سایر استانداردها حاوی ۱ میلی لیتر می باشند) . st ۴) سرم کنترل : دو ویال هر کدام حاوی ۱ میلی لیتر سرم کنترل با غلظت مشخص درج شده بر روی برچسب ویال . ۵) محلول اسی بافر (Buffer Assay ( : یک ویال حاوی ۶ میلی لیتر (آماده مصرف) . ۶) محلول رنگزای یک مرحله ای (Substrate-Chromogen (: یک ویال حاوی ۱۲ میلی لیتر (آماده مصرف) . ۷) محلول شستشو (Solution Wash (: یک ویال حاوی ۵۰ میلی لیتر محلول شستشوی غلیظ (X20(. جهت تهیه محلول شستشوی آماده مصرف، مقدار مورد نیاز را با آب مقطر به نسبت ۱/۲۰ رقیق نمایید . ۸) محلول متوقف کننده (Solution Stop (: یک ویال حاوی ۱۲ میلی لیتر اسید کلریدریک ۱ نرمال . ۹) برچسب مخصوص پلیت . 

شرایط نگهداری کیتCEA پیشتازطب ۹۶تستی:

۱) کیت را در یخچال بین دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی گراد نگهداری نمایید . ۲) چاهکها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نمگیر نگهداری نمایید . ۳) پایداری محتویات کیت تا پایان مدت انقضاء نوشته شده بر روی هر یک از آنها می باشد . ۴) محلول شستشوی آماده مصرف که به نسبت ۱/۲۰ رقیق شده باشد به مدت یک هفته در شرایط ۸ - ۲ درجه سانتی گراد قابل نگهداری و مصرف می باشد . 

مراحل انجام آزمایش کیتCEA پیشتازطب ۹۶تستی:

۱) تعداد چاهکهای مورد نظر را انتخاب نموده و سایر چاهکها را به همراه نمگیر درون کیسه مخصوص نگهداری پلیت قرار داده و درب آن را ببندید . ۲) ۵۰ میکرولیتر از هر استاندارد، سرم کنترل و نمونه را به داخل هر چاهک بریزید، پیشنهاد می گردد که از استانداردها و نمونه ها بصورت داپلیکیت استفاده شود بدین معنی که هر استاندارد و نمونه را در دو چاهک بریزید و در انتها از میانگین جذب نوری آنها برای محاسبه نتایج استفاده کنید . ۳) ۵۰ میکرولیتر از محلول اسی بافر (Buffer Assay (را به هر چاهک اضافه نموده و پلیت را به آرامی به مدت ۱۵ ثانیه تکان دهید تا محتویات آن بخوبی مخلوط شوند درب چاهکها را با برچسب مخصوص پلیت پوشانده و چاهکها را به مدت ۳۰ دقیقه در درجه حرارت اتاق (۲۸ - ۲۲ درجه سانتی گراد) انکوبه نمایید . ۴) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید. (برای شستشو می توان از سمپلر ۸ کاناله استفاده نمود ولی باید مواظب محلول شستشو در هر چاهک ریخته و سپس چاهک ها را با وارونه کردن و تکاندن خالی نمایید و در انتهای عملیات شستشو چاهکها را در حالت وارونه و با ضربات ملایم بود که محلول شستشو از یک چاهک به چاهک دیگر وارد نشود زیرا می تواند موجب ایجاد خطا در نتیجه آزمایش گردد ، در هر دفعه شستشو حدود ۳۰۰ میکرولیتر بر روی یک پارچه یا کاغذ نمگیر بزنید تا قطرات اضافی خارج شوند) . ۵) ۱۰۰ میکرولیتر از محلول آنزیم کنژوگه (Conjugate Enzyme (را به هر چاهک اضافه نموده و چاهکها را به مدت ۳۰ دقیقه در درجه حرارت اتاق (۲۸ - ۲۲ درجه سانتی گراد) انکوبه نمایید . ۶) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید (همانند بند ۴) . ۷) ۱۰۰ میکرولیتر محلول رنگزا (Substrate-Chromogen (به هر چاهک اضافه نمایید . ۸) چاهکها را به مدت ۱۵ دقیقه در درجه حرارت اتاق و در تاریکی انکوبه نمایید .۹) با اضافه کردن ۱۰۰ میکرولیتر محلول متوقف کننده (Solution Stop (به هر چاهک ادامه واکنشهای آنزیمی را متوقف نمایید. برای سنجش جذب نوری از دستگاه الایزاریدر با فیلتر nm 450 استفاده نمایید. (توصیه می شود از فیلتر nm 630 به عنوان فیلتر رفرانس استفاده گردد) .