تجهیزات آزمایشگاهی
دستگاه های آزمایشگاهی
دستگاه نو
دستگاه کار کرده
مصرفی عمومی آزمایشگاه
مصرفی مراکز درمانی
ایمونولوژی و هورمون
پاتولوژی و سیتولوژی
بیوشیمی
هماتولوژی
مواد شیمیایی
محتویات کیت :
۱) یک عدد پلیت دارای ۹۶عدد چاهک پوشش داده شده با آنتی بادی منوکلونال ضد ۴HE .
۲) محلول اسی بافر ( Buffer Assay (: یک ویال ۱۲ میلی لیتری حاوی محلول جهت رقیق کردن نمونه ها (آماده برای مصرف - آبی رنگ) .
۳) محلول آنزیم کنژوگه (Conjugate Enzyme (: یک ویال ۱۲ میلی لیتری حاوی محلول آنتی بادی ضد ۴HE متصل شده به آنزیم پراکسیداز (آماده برای مصرف-
۴) سری استانداردها (Set Standards (: شامل ۶ ویال از استاندارد با غلظتهای صفر ‚ ۲۵‚ ۱۰۰ ‚ ۲۰۰ ‚ ۴۰۰ و ۸۰۰ L/pmol از ۴HE) استاندارد صفر حاوی ۲ میلی قرمز رنگ) .
لیتر و سایر استانداردها حاوی ۱ میلی لیتر می باشند) (آماده برای مصرف - بنفش رنگ) .۵) سرم کنترل پایین (Serum Control Low (: یک ویال ۱ میلی لیتری سرم انسانی حاوی مقدار مشخص ۴HE رقیق شده در محلول بافری دارای پروتئین به عنوان
پایدار کننده و %۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ (آماده برای مصرف - زرد رنگ) . غلظت دقیق کنترل روی ویال ذکر شده است .
۶) سرم کنترل بالا (Serum Control High (: یک ویال ۱ میلی لیتری سرم انسانی حاوی مقدار مشخص ۴HE رقیق شده در محلول بافری دارای پروتئین به عنوان
پایدار کننده و %۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ (آماده برای مصرف - قرمز رنگ) . غلظت دقیق کنترل روی ویال ذکر شده است .
۷) محلول رنگزای یک مرحله ای (Substrate-Chromogen (: یک ویال ۱۲ میلی لیتری حاوی تترا متیل بنزیدین و آب اکسیژنه (آماده برای مصرف- بی رنگ)
۸) محلول شستشو (Buffer Wash (: یک ویال ۵۰ میلی لیتری حاوی محلول شستشوی غلیظ (x20 (دارای محلول بافر فسفات و %۰/۰۵ توئین ۲۰ ، جهت تهیه محلول
شستشوی آماده مصرف ، مقدار مورد نیاز را با آب مقطر به نسبت۲۰ ۱/ رقیق نمایید .
۹) محلول متوقف کننده (Solution Stop (: یک ویال ۱۲ میلی لیتری حاوی اسید کلریدریک ۱ نرمال .
۱۰) یک عدد برچسب مخصوص پلیت .
۱۱) دستورالعمل مصرف شرایط نگهداری :
۱) کیت را در یخچال بین دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی گراد نگهداری نمایید .
۲) چاهکها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نمگیر نگهداری نمایید .
۳) پایداری محتویات کیت تا پایان مدت انقضای نوشته شده بر روی هر یک از آنها می باشد .۴) ممکن است در محلول شستشوی غلیظ کریستال تشکیل شود که این امر مشکلی را ایجاد نمی نماید . قبل از تهیه محلول شستشوی کار ، برای حل شدن کریستالها ، ویال را
در ۳۷ درجه سانتی گراد قرار دهید . محلول شستشو را به نسبت ۱/۲۰ به میزان مورد نیاز با آب مقطر رقیق نمایید ؛ این محلول (آماده مصرف) به مدت یک هفته در شرایط
-۸ ۲ درجه سانتیگراد قابل نگهداری و مصرف می باشد . مراحل انجام آزمایش :
۲) ۲۰ میکرولیتر از هر استاندارد، سرم کنترل و نمونه را به داخل هر چاهک بریزید ، پیشنهاد می گردد که از استانداردها و نمونه ها بصورت داپلیکیت استفاده شود بدین معنی ۱) تعداد چاهکهای مورد نظر را انتخاب کرده و سایر چاهکها را به همراه نمگیر درون کیسه مخصوص نگهداری پلیت قرار داده و درب آن را ببندید .
که هر استاندارد و نمونه را در دو چاهک بریزید و در انتها از میانگین جذب نوری آنها برای محاسبه نتایج استفاده کنید . استانداردها، سرم های کنترل و نمونه ها را طبق دستور
زیر در چاهک ها بریزید ؛
شش چاهک اول برای استانداردهای مختلف ، دو چاهک بعدی به ترتیب برای سرم کنترل پایین و بالا و سایر چاهک ها را برای نمونه ها استفاده کنید.
۳) ۱۰۰ میکرولیتر از محلول اسی بافر (Buffer Assay (را به هر چاهک اضافه نموده و پلیت را به آرامی به مدت ۱۵ ثانیه تکان دهید تا محتویات آن بخوبی مخلوط شوند
درب چاهکها را با برچسب مخصوص پلیت پوشانده و چاهکها را به مدت ۳۰ دقیقه در درجه حرارت اتاق (۲۸ - ۲۲ درجه سانتی گراد) انکوبه نمایید .
۴) محتویات چاهک ها را خالی کرده و چاهک ها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید . برای شستشو چنانچه دستگاه واشر اتوماتیک در دسترس نباشد می توان از
سمپلر ۸ کاناله استفاده نمود ولی باید مواظب بود که محلول شستشو از یک چاهک به چاهک دیگر وارد نشود زیرا می تواند موجب ایجاد خطا در نتیجه آزمایش گردد . در هر
دفعه شستشو حدود ۳۰۰ میکرولیتر محلول شستشو در هر چاهک ریخته و سپس چاهک ها را با وارونه کردن و تکاندن خالی نمایید و در انتهای عملیات شستشو ، چاهک ها را
در حالت وارونه و با ضربات ملایم بر روی یک پارچه یا کاغذ نمگیر بکوبید تا قطرات اضافی خارج شوند .۵) ۱۰۰ میکرولیتر از محلول آنزیم کنژوگه (Conjugate Enzyme (آماده مصرف را به داخل چاهک ها بریزید ؛ پس از پوشاندن چاهک ها توسط برچسب مخصوص پلیت،
چاهکها را به مدت ۳۰ دقیقه در دمای اتاق (۲۲-۲۸ درجه سانتی گراد) انکوبه نمایید .
۶) محتویات چاهک ها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید ( همانند بند ۴ ) .
۷) ۱۰۰ میکرولیتر محلول رنگزا (Substrate-Chromogen ( به هر چاهک اضافه نمایید ؛ چاهک ها را به مدت ۱۵ دقیقه در درجه حرارت اتاق و در تاریکی قرار دهید .
۸) با اضافه کردن ۱۰۰ میکرولیتر محلول متوقف کننده (Solution Stop (به هر چاهک ، واکنش های آنزیمی را متوقف نمایید . برای سنجش جذب نوری هر چاهک از
دستگاه الایزا ریدر با فیلتر nm 450 استفاده نموده و جذب نوری چاهک ها را قرائت نمائید . توصیه می شود از فیلتر nm 630 به عنوان فیلتر رفرانس استفاده گردد .
نقد و بررسی‌ها
Clear filtersهنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.