محتویات کیت :۱) پلیت ۹۶ خانه حاوی چاهک های پوشش داده شده با آنتی ژنهای سطحی باکتری Brucella) SLPS ).۲) محلول رقیق کننده نمونه (Diluent Sample (: 1 ویال حاوی ۵۰ میلی لیتر محلول جهت رقیق کردن نمونه ها .۳) محلول اسی بافر (Buffer Assay (: 1 ویال حاوی ۷/۵ میلی لیتر محلول IgG human Anti جهت مهار کردن روماتویید فاکتور و غلظتهای بالای IgG در نمونه ها
۴) محلول آنزیم کنژوگه آماده مصرف (Conjugate Enzyme (: یک ویال حاوی ۱۲ میلی لیتر آنتی بادی ضد IgM انسانی متصل شده به آنزیم پراکسیداز .۵) سرم کنترل مثبت (Control Positive (: یک ویال حاوی ۱/۵ میلی لیتر محلول بافری، دارای پروتئین به عنوان پایدار کننده و ۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ و
سرم انسانی غیر فعال شده ، حاوی آنتی بادی IgM علیه Brucella .۶) سرم کنترل منفی (Control Negative (: یک ویال حاوی ۲ میلی لیتر محلول دارای بافر فسفات و %۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ و سرم انسانی منفی از نظر
آنتی بادیIgM علیه Brucella .۷) محلول رنگزای یک مرحله ای (Substrate-Chromogen (: 1 ویال حاوی ۱۲ میلی لیتر تترا متیل بنزیدین و آب اکسیژنه (آماده برای مصرف) .۸) محلول شستشو (Buffer Wash (: دو ویال حاوی۵۰ میلی لیتر محلول شستشوی غلیظ (X10 (دارای محلول بافر فسفات و %۰/۰۵ توئین . جهت تهیه محلول
شستشوی آماده مصرف، مقدار مورد نیاز را با آب مقطر به نسبت ۱/۱۰ رقیق نمایید۹) محلول متوقف کننده (Solution Stop (: یک ویال حاوی ۱۲میلی لیتر اسید کلریدریک ۱ نرمال .۱۰) برچسب مخصوص پلیت . شرایط نگهداری :۱) کیت را در یخچال بین دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی گراد نگهداری نمایید .۲) چاهکها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نمگیر نگهداری نمایید . پایداری پلیت پس از باز کردن کیسه آن ۴ ماه میباشد .۳) پایداری محتویات کیت تا پایان مدت انقضای نوشته شده بر روی هر یک از آنها می باشد .۴) ممکن است در محلول شستشوی غلیظ کریستال تشکیل شود که این امر مشکلی را ایجاد نمی نماید . قبل از تهیه محلول شستشوی کار، برای حل شدن کریستالها ،
ویال را در ۳۷ در جه سانتی گراد قرار دهید . محلول شستشو را به نسبت ۱/۱۰ با آب مقطر رقیق نمایید ؛ این محلول (آماده مصرف) به مدت یک هفته در شرایط ۲-۸
درجه سانتیگراد قابل نگهداری و مصرف می باشد. مراحل انجام آزمایش :۱) تعداد چاهکهای مورد نظر را انتخاب کرده و سایر چاهکها را به همراه نمگیر درون کیسه مخصوص نگهداری پلیت قرار داده و درب آن را ببندید .۲) ۱۰۰ میکرولیتر از کنترل ها و ۱۰۰ میکرولیتر از نمونه های آماده شده را طبق دستور زیر در چاهک ها بریزید ؛ دو چاهک اول را برای بلانک و کنترل مثبت در نظر
بگیرید . کنترل منفی را به صورت دوپلیکیت ریخته و سایر چاهک ها را برای نمونه ها استفاده کنید ؛ پس از پوشاندن چاهکها توسط برچسب مخصوص پلیت ، چاهکها را
برای مدت ۳۰ دقیقه در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد قرار دهید .۳) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید . برای شستشو چنانچه دستگاه واشر اتوماتیک در دسترس نباشد می توان
از سمپلر ۸ کاناله و یا سرنگ استفاده نمود ولی باید مواظب بود که محلول شستشو از یک چاهک به چاهک دیگر وارد نشود زیرا می تواند موجب ایجاد خطا در نتیجه
آزمایش گردد . در هر دفعه شستشو حدود ۳۰۰ میکرولیتر محلول شستشو در هر چاهک ریخته و سپس چاهک ها را با وارونه کردن و تکاندن خالی نمایید و در انتهای
عملیات شستشو ، چاهکها را در حالت وارونه و با ضربات ملایم بر روی یک پارچه یا کاغذ نمگیر بکوبید تا قطرات اضافی خارج شوند .۴) ۱۰۰ میکرولیتر از محلول آنزیم کنژوگه آماده مصرف را داخل چاهکها به استثنای چاهک بلانک بریزید ؛ پس از پوشاندن چاهکها توسط برچسب مخصوص پلیت ،
چاهکها را به مدت ۳۰ دقیقه در دمای ۳۷ درجه سانتی گراد قرار دهید .۵) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید ( همانند بند ۳) .۶) ۱۰۰ میکرولیتر محلول رنگزا (Substrate-Chromogen (به همه چاهکها اضافه نمایید ؛ چاهکها را به مدت ۱۵ دقیقه در درجه حرارت اتاق و در تاریکی قرار دهید .۷) با اضافه کردن ۱۰۰ میکرولیتر محلول متوقف کننده (Solution Stop (به هر چاهک ، واکنشهای آنزیمی را متوقف نمایید . برای سنجش جذب نوری هر چاهک از
دستگاه الایزاریدر با فیلتر nm 450 استفاده نموده و جذب نوری چاهکها را قرائت نمایید . توصیه میشود از فیلتر nm 630 به عنوان فیلتر رفرانس استفاده گردد .
محصولات مرتبط
کیت تروپونین ویتروتک
امتیاز 0 از 5
نقد و بررسیها
Clear filtersهنوز بررسیای ثبت نشده است.