محتویات کیت:۱) یک عدد پلیت دارای ۹۶عدد چاهکهای پوشش داده شده با آنتی ژنهای dsDNA۲) محلول رقیق کننده نمونه (Diluent Sample(: دو ویال۵۰ میلی لیتری حاوی محلول جهت رقیق کردن نمونه ها (آماده برای مصرف-آبی رنگ)۳) سری استانداردها (Set Standard (: شامل ۴ ویال ۱ میلی لیتری از استاندارد با غلظتهای۰‚۱۰۰‚۴۰۰‚ ۸۰۰ ml/IU از dsDNA-Anti کالیبره شده در مقابل استاندارد
مرجع ۱۵/۱۷۴ :NIBSC سازمان بهداشت جهانی (آماده برای مصرف-سبز رنگ)۴) محلول آنزیم کونژوگه آماده مصرف (Conjugate Enzyme(: یک ویال ۱۲ میلی لیتری حاوی محلول آنتی بادی ضد IgG انسانی متصل شده به آنزیم پراکسیداز
(آماده برای مصرف-قرمز رنگ)۵) سرم کنترل بالا (Control High): یک ویال ۱ میلی لیتری حاوی محلول بافری، دارای پروتئین به عنوان پایدار کننده و %۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ و سرم
انسانی غیر فعال شده، حاوی آنتی بادی IgG علیه dsDNA) آماده برای مصرف-بنفش رنگ). غلظت دقیق کنترل روی ویال ذکر شده است.۶) سرم کنترل پایین (Control Low(: یک ویال ۱ میلی لیتری حاوی محلول دارای بافر فسفات و %۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ و سرم انسانی منفی از نظر آنتی
بادی IgG علیه dsDNA) آماده برای مصرف- زرد رنگ)۷) محلول رنگزای یک مرحله ای (Substrate-Chromogen): یک ویال ۱۲ میلی لیتری حاوی تترامتیل بنزیدین و آب اکسیژنه (آماده برای مصرف- بی رنگ)
۸) محلول شستشو (Buffer Wash): یک ویال ۵۰ میلی لیتری حاوی محلول شستشوی غلیظ (x10)دارای محلول بافر فسفات و %۰/۰۵ توئین، جهت تهیه محلول
شستشوی آماده مصرف، مقدار مورد نیاز را با آب مقطر به نسبت ۱/۱۰ رقیق نمایید.۹) محلول متوقف کننده (Solution Stop): یک ویال ۱۲ میلی لیتری حاوی اسیدکلریدریک ۱ نرمال۱۰) یک عدد برچسب مخصوص پلیت۱۱) دستورالعمل مصرف شرایط نگهداری:۱) کیت را در یخچال بین دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی گراد نگهداری نمایید.۲) چاهکها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نمگیر نگهداری نمایید.۳) پایداری محتویات کیت تا پایان مدت انقضای نوشته شده بر روی هر یک از آنها می باشد.۴) ممکن است در محلول شستشوی غلیظ کریستال تشکیل شود که این امر مشکلی را ایجاد نمی نماید. قبل از تهیه محلول شستشوی کار، برای حل شدن کریستالها، ویال را در
۳۷ درجه سانتی گراد قرار دهید. محلول شستشو را به نسبت ۱/۱۰ با آب مقطر رقیق نمایید. این محلول (آماده مصرف) به مدت یک هفته در شرایط -۸ ۲ درجه سانتی گرادقابل نگهداری و مصرف می باشد. مراحل انجام آزمایش:۱) تعداد چاهکهای مورد نظر را انتخاب کرده و سایر چاهکها را به همراه نمگیر درون کیسه مخصوص نگهداری پلیت قرار داده و درب آن را ببندید .۲) ۱۰۰ میکرولیتر از هر استاندارد، سرم های کنترل و نمونه های آماده شده را طبق دستور زیر در چاهکها بریزید.برای سنجش کمی، اولین چاهک برای بلانک، چهار چاهک بعدی برای استانداردهای مختلف، دو چاهک بعدی به ترتیب برای سرم کنترل پایین و بالا و سایر چاهکها را برای
نمونه ها استفاده کنید، پیشنهاد می گردد استانداردها و نمونه ها به صورت دوپلیکیت استفاده شود و در انتها میانگین جذب نوری آنها برای محاسبه نتایج استفاده گردد.
برای سنجش نیمه کمی، اولین چاهک برای بلانک، چاهک بعدی برای استاندارد (استاندارد ml/IU 100(، دو چاهک بعدی به ترتیب برای سرم کنترل پایین و بالا و سایر
چاهکها را برای نمونه ها استفاده کنید. پس از پوشاندن درب چاهکها توسط برچسب مخصوص پلیت، چاهکها را به مدت ۶۰ دقیقه در دمای اتاق (۲۲-۲۸ درجه سانتی گراد)
انکوبه نمایید.۳) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید. برای شستشو چنانچه دستگاه واشر اتوماتیک در دسترس نباشد می توان از
سمپلر ۸ کاناله استفاده نمود ولی باید مواظب بود که محلول شستشو از یک چاهک به چاهک دیگر وارد نشود زیرا می تواند موجب ایجاد خطا در نتیجه آزمایش گردد. در هر
دفعه شستشو حدود ۳۰۰ میکرولیتر محلول شستشو در هر چاهک ریخته و سپس چاهکها را با وارونه کردن و تکاندن خالی نمایید و در انتهای عملیات شستشو، چاهکها را
درحالت وارونه و با ضربات ملایم بر روی یک پارچه یا کاغذ نمگیر بکوبید تا قطرات اضافی خارج شوند .۴) ۱۰۰ میکرولیتر از محلول آنزیم کونژوگه (Conjugate Enzyme (آماده مصرف را به داخل چاهکها بریزید. پس از پوشاندن چاهکها توسط برچسب مخصوص پلیت،
چاهکها را به مدت ۳۰ دقیقه در دمای اتاق (۲۲-۲۸ درجه سانتی گراد) انکوبه نمایید .۵) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید (همانند بند ۳).۶) ۱۰۰ میکرولیتر محلول رنگزا (Substrate-Chromogen (به هر چاهک اضافه نمایید. چاهکها را به مدت ۱۵ دقیقه در درجه حرارت اتاق و در تاریکی قرار دهید .۷) با اضافه کردن ۱۰۰ میکرولیتر محلول متوقف کننده (Solution Stop (به هر چاهک واکنشهای آنزیمی را متوقف نمایید. برای سنجش جذب نوری هر چاهک از دستگاه
الایزاریدر با فیلتر nm 450 استفاده نموده و جذب نوری چاهکها را قرائت نمائید. توصیه می شود از فیلتر nm630 به عنوان فیلتر رفرانس استفاده گردد .
محصولات مرتبط
کیت Echinococcus IgG پیشتازطب ۹۶تستی
امتیاز 0 از 5
کیت AFP پیشتازطب ۹۶تستی
امتیاز 0 از 5
کیت PTH مونوکیت ۹۶تستی
امتیاز 0 از 5
نقد و بررسیها
Clear filtersهنوز بررسیای ثبت نشده است.