مراحل رنگ آمیزی آلیزارین رد

پروتکل رنگ آمیزی اختصاصی آلیزارین رد در بافت شناسی:

جهت انجام روش رنگ آمیزی با آلیزارین رد s، می بایست ابتدا محلول رنگی مورد نظر را طبق پروتکل شرکت تولید کننده پودر رنگی آلیزارین رد،با حل کردن مقدار ذکر شده در پروتکل در حجم مشخصی از آب مقطر تهیه کرده و pH محلول را با آمونیوم هیدروکساید۱۰٪ تنظیم می کنیم. میزان pH محلول رنگی بسیار مهم و تاثیرگذار در روند نتیجه انجام تکنیک است،لذا ضروری است محلول تازه تهیه شود و یا برای محلول با ماندگاری بیش از یک ماه، pH را مجددا چک میکنیم.

مراحل رنگ آمیزی نمونه بافتی در رنگ آمیزی اختصاصی آلیزارین رد:

۱.اسلاید های حاوی نمونه بافتی فیکس شده را به مدت ۳۰ثانیه الی ۵دقیقه در جار لام حاوی محلول آلیزارین رد قرار میدهیم و با رسوبات کلسیمی قرمز-نارنجی باشد،اضافه های رنگ را با تکان دادن اسلاید حذف میکنیم.

۲.اکنون هر یک از لام ها را با ۲۰ قطره استون دهیدراته میکنیم.سپس به هر یک از نمونه ها ۲۰قطره محلول استوت -زایلین (نسبت ۱:۱)اضافه میکنیم.

۳.لام نمونه هارا با زایلین شفاف سازی نموده و پس از خشک شدن لام،باچسب انتلان و لامل مونت میکنیم.

مراحل آماده سازی لام از نمونه بافتی در رنگ آمیزی اختصاصی آلیزارین رد برش گیری از بلوک پارافینی:

پس از قالب گیری پارافینی نمونه بافتی،در این مرحله از نمونه فیکس شده در پارافین با دستگاه میکروتوم برش های نازک در حد ۳-۵ میکرون تهیه کنیم