ریل تایم real-time PCR

 ریل تایم real-time PCR

دستگاه ریل تایم PCR چیست؟

•  ریل تایم real-time PCR (ریل تایم پی سی آر) به جهت بررسی میزان بیان ژن های موجودات زنده توسعه یافته است. محدودیتی که سیستم PCR ساده بوجود آورده است عدم توانایی بررسی کمی میزان بیان یک ژن می باشد.
• لذا سیستمی تحت عنوان real-time PCR (ریل تایم پی سی آر) ساخته شده و توسعه یافته است.
• ریل تایم پی سی آر دستگاهی است که بر پایه تولید نور فلورسنت حین انجام واکنش PCR می‌باشد. در این روش چون به مقدار زیادی از الگو نیاز نیست، در نتیجه در میزان استفاده از منبع الگو و زمان صرفه جویی می‌شود.
• امروزه Real-time PCR با داشتن حساسیت بسیار بالا و سهولت در انجام کار، بسیار مورد استفاده قرار می‌گیرد. همچنین برای مشاهده نتایج واکنش نظیر پی سی آر کلاسیک، نیازی به الکتروفورز نمی‌باشد.

کاربرد ریل تایم real-time PCR

• در ریل تایم real-time PCR جهت بررسی بیان یک ژن، ابتدا با کمک آنزیم رونوشت بردار معکوس (Reverse Transcriptase) مولکول های RNA را به DNA های مکمل که عموما cDNA نامیده می شوند، تبدیل می شوند. پس از پایداری مولکول مورد سنجش، وارد سیکل های real-time PCR (ریل تایم پی سی آر) شده و بیان مورد بررسی قرار می گیرد.
•  ریل تایم real-time PCR از یک سیستم اپتیکی بهره برده که توسط آن میزان DNA هر نمونه محاسبه می گردد. زمانی که cDNA سنتز شد، پس از آماده سازی نمونه جهت ورود به سیکل های پلیمریزه شدن، به نمونه DNA رنگی تحت عنوان سایبر گرین (SYBR Green) اضافه می گردد.
• سایبر گرین (SYBR Green) موجب رنگ شدن DNA شده و همچنین خود دارای خاصیت فلورسانتی می باشد.
• زمانی که ریل تایم real-time PCR سیکل های پلیمریزاسیون خود را شروع کرد، به ازای ساخته شدن رشته های DNA جدید، رنگ سایبر گرین (SYBR Green) به رشته متصل می شود و دستگاه ریل تایم real-time PCR توسط سیستم اپتیکی خود خوانش فلورسانتی را شروع می کند.
• لذا دستگاه ریل تایم real-time PCR با خاصیت فلورسانتی سایبر گرین (SYBR Green) برای هر نمونه یک گراف تکثیر ترسیم می کند.
• هر نقطه از گراف تکثیر نشان دهنده میزان اتصال سایبر گرین (SYBR Green) به رشته DNA می باشد و در نهایت گراف که در نمایشگر متصل شده به دستگاه ریل تایم real-time PCR به نمایش در آمده، به آستانه خود می رسد. این میزان نشان دهنده میزان DNA بیان شده در هر نمونه می باشد.
• لذا با توجه به اینکه مقایساتی که کمی گزارش می شوند نسبت به گزارشات کیفی از ارزش بالاتری برخوردار هستند، تکنیک ریل تایم real-time PCRنیز نسبت به تکنیک هایی چون RT-PCR که میزان RNA تولید شده در سلول را به شکل کیفی گزارش می کند، از ارزش بالاتری برخوردار می باشد.

اینجا محلی برای تبادل دستگاه ها بین آزمایشگاه ها و شرکت های فروش تجهیزات آزمایشگاهی است.شما میتوانید با مراجعه به دیوار نیازطب از موجودی دستگاه های کارکرده دست دوم و نو مطلع شوید.شما میتوانید با کامل کردن فرم ثبت دستگاه در دیوار نیاز طب به راحتی دستگاه های کارکرده آزمایشگاهی خود را به فروش برسانید.دیوار نیاز طب بستری مطمئن جهت ارتباط آزمایشگاه ها با تامین کننده های دستگاه ها و بالعکس در جهت خدمت به آزمایشگاه های سراسر ایران فعالیت می کند.