آنتی بادی PSA بایوتک

دستورالعمل استفاده آنتی بادی PSA بایوتک:

نکات مهم در رنگ آمیزی به روش دستی :

• از روش (HIRE (Retrieval Epitope Induced-Heat در 9=PH بمدت 30-10 دقیقه استفاده شود. مدت زمان بازیافت آنتی ژن بسته به مدت زمان فیکس شدن بافت متفاوت است و الزم است هر آزمایشگاه این مدت زمان را بهینه نماید.
• در محلول بالکینگ پراکسیداز بمدت 5 تا 10 دقیقه در دماي محیط بالک شود )اگر از سیستم آلکالین فسفاتاز استفاده می شود این مرحله نیاز نیست(.
• از آنتی بادي اولیه غلیظ در رقت1:100 تا 1:200 بمدت 30 تا 45 دقیقه در دماي محیط استفاده کنید )در صورتی که آنتی بادي از نوع آماده مصرف use to ready باشد از رقیق نمودن آن اجتناب کنبد و آن را به همان صورت دریافت شده مصرف نمایید(. رقت و مدت زمان انکوباسیون برش بافت با آنتی بادیها به افینیتی آنتی بادي، نوع آنتی بادي ثانویه و سیستم رنگ آمیزي بستگی دارد. لذا این متغیرها می بایست در هر آزمایشگاه بهینه شود.
• آنتی بادي ثانویه بمدت 45-30 دقیقه در دماي محیط انکوبه شود )بسته به نوع کیت که تک مرحله یا 2 مرحله باشد زمان متغیر است (.
• از سوبستراي DAB یا Red Fast بمدت 15-5 دقیقه در دماي محیط استفاده شود.
• اسالید را با هماتوکسین رنگ آمیزي و پس از شستشو با آب مقطر، با محلول blueing بمدت 30 ثانیه مجاور شود.
• پس از خشک شدن اسالید، المل روي آن قرار گرفته شود.

روش رنگ آمیزی پیشنهادی در دستگاه های اتوماتیک :

-نکات مهم در روش رنگ آمیزی با سیستم خودکار )اتوماتیک( با دستگاه ULTRA BenchMark Ventana

• رقت پیشنهادي آنتی بادي 1:30 تا 1:60 است.
• از کیت IHC DAB View Ultra استفاده نمائید.
• پروتکل مرحله اول 32 تا 64 دقیقه در دماي 100 درجه سانتیگراد.
• آنتی بادي اولیه به مدت 32 دقیقه در دماي 36 درجه سانتیگراد استفاده شود.

-نکات مهم در روش رنگ آمیزی با دستگاه Autostainer MAX-BOND’ Biosystems Leica

•  زمان Incubation Marker بمدت 30 دقیقه انجام گیرد.
•  روش (HIER (retrieval epitope induced-Heat با استفاده از محلول ER Bond بمدت 2 تا 30 دقیقه انجام گیرد.

هشدارها و اقدامات احتیاطی:

• اطمینان حاصل کنید که از روش هاي مناسب کار با معرف پیروي می کنید. همیشه از روپوش آزمایشگاهی ، دستکش یکبار مصرف و سایر تجهیزات حفاظت فردي مناسب استفاده کنید.
•  از خوردن آنتی بادي پرهیز کنید و از تماس آن با چشم و سایر غشاهاي مخاطی خودداري کنید. در صورت هر گونه تماس با آنتی بادي ناحیه را با مقدار زیادي آب بشویید.
•  براي اطمینان از پایداري آنتی بادي و دقت نتایج، اطمینان حاصل کنید که آنتی بادي با میکروب ها آلوده نشود براي اینکار الزم است از وسایل استریل استفاده نمائید.
• در حین کار با آنتی بادي آن را براي زمان طوالنی در مجاورت دماي محیط قرار ندهید و بالفاصله پس از استفاده آن را به یخچال منتقل نمائید.