کیت HCV Ab پیشتازطب ۹۶تستی

محتویات کیت HCV Ab پیشتازطب ۹۶تستی:

۱) پلیت ۹۶ خانه حاوی چاهکهای پوشش داده شده با آنتی ژنهای اختصاصی HCV .۲) محلول آنزیم کونژوگه (Conjugate Enzyme): یک ویال حاوی ۱ میلی لیتر کونژوگه غلیظ (X 20 (دارای منوکلونال آنتی هیومن IgG و IgM نشاندار شده با پراکسیداز در محلول بافری حاوی پروتئین و نگهدارنده. این محلول را باید قبل از مصرف، با محلول رقیق کننده کونژوگه به نسبت ۱/۲۰ رقیق نمود . ۳) محلول رقیق کننده کونژوگه (Diluent Conjugate ): یک ویال حاوی ml 15محلول بافری سبز رنگ، دارای پروتئین به عنوان پایدار کننده و %۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ.۴) محلول رقیق کننده نمونه (Diluent Sample ): یک ویال حاوی ml 25 محلول بافری قرمز رنگ، دارای پروتئین به عنوان پایدار کننده و %۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ و %۰/۰۲ توئین، جهت رقیق سازی سرمها .۵)سرم کنترل مثبت (Control Positive ): یک ویال حاوی ml 3 محلول بافری قرمز رنگ، دارای پروتئین به عنوان پایدار کننده و %۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ و سرم انسانی غیر فعال شده، حاوی آنتی بادی علیه HCV .۶) سرم کنترل منفی (Control Negative): یک ویال حاوی ml 5 محلول زرد رنگ دارای بافر فسفات و %۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ و سرم انسانی منفی از نظر آنتی بادیHCV..۷) محلول رنگزای یک مرحله ای (Substrate-Chromogen (: 1 ویال حاوی ۱۲ میلی لیتر تترا متیل بنزیدین و آب اکسیژنه (آماده برای مصرف) . ۸) محلول شستشو : یک ویال حاوی ۵۰ میلی لیتر محلول شستشوی غلیظ (X20 (محتوی محلول بافر فسفات و %۰/۰۵ توئین . جهت تهیه محلول شستشوی آماده مصرف، مقدار مورد نیاز را با آب مقطر به نسبت ۱/۲۰ رقیق نمایید .۹) محلول متوقف کننده (Solution Stop ): یک ویال حاوی ۱۲میلی لیتر اسید کلریدریک ۱ نرمال .۱۰) برچسب مخصوص پلیت . 

نکات قابل ذکر برای مصرف کنندگان :

۱) محتویات این کیت تنها برای مصرف در همین کیت قابل استفاده هستند .۲) این کیت صرفا جهت اندازه گیری HCV-Anti در سرم و پلاسمای انسانی طراحی و ساخته شده است .۳) از مخلوط کردن محتویات کیتها با شماره ساختهای مختلف جداً خودداری نمایید .۴) کلیه مواد موجود در کیت که منشاء سرمی دارند از نظر وجود Ag.HBs و آنتی بادیهای ضد HIV کنترل گردیده و فاقد این عوامل میباشند (کنترل مثبت کیت حاوی آنتی بادیهای HCV و از نظرآنتی ژن HCV غیر فعال شده است. غیر فعال سازی سرم یا پلاسما بمدت نیم ساعت در ۵۶ درجه سانتی گراد انجام گرفته است). جهت احتیاط بهتر است کاربرانی که با کیت کار می کنند از تماس مستقیم با مواد بپرهیزند .۵) هنگام انجام آزمایش حتماً از دستکشهای یکبار مصرف استفاده کنید . همچنین استفاده از عینکهای آزمایشگاهی هنگام کار با سرمهای بیماران توصیه می شود .۶) سرمهای مثبت از نظر آنتی بادیهای ضد HCV ، وسایل و محلولهای wash مشکوک به آلودگی را بعد از اتمام کار به مدت حداقل ۳۰ دقیقه در مجاورت محلول هیپوکلریت سدیم %۵ یا محلولهای مناسب ضد عفونی کننده دیگر قرار دهید . همچنین اتوکلاو ، به مدت ۲۰ دقیقه در ۱۲۱ درجه سانتی گراد پیشنهاد می گردد . 

شرایط نگهداری کیت HCV Ab پیشتازطب ۹۶تستی:

۱) کیت را در یخچال بین دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی گراد نگهداری نمایید .۲) چاهکها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نمگیر نگهداری نمایید. پایداری پلیت بعد از باز کردن کیسه آن ۴ ماه میباشد .۳) پایداری محتویات کیت (قبل از باز شدن درب کیت) تا پایان مدت انقضاء یاد شده بر روی هر یک از آنها می باشد .۴) محلول شستشو را به نسبت ۱/۲۰ با آب مقطر رقیق نمایید. این محلول (آماده مصرف) به مدت یک هفته در شرایط ۸ - ۲ درجه سانتیگراد قابل نگهداری و مصرف می باشد. 

مراحل انجام آزمایش کیت HCV Ab پیشتازطب ۹۶تستی:

۱) تعداد چاهکهای مورد نظر را انتخاب نموده و سایر چاهکها را به همراه نمگیر درون کیسه مخصوص نگهداری پلیت قرار داده و درب آن را ببندید. چاهک اول را به عنوان بلانک انتخاب نموده و در ادامه دو چاهک برای کنترل منفی و یک چاهک برای کنترل مثبت در نظر بگیرید . ۲) ۲۰۰ میکرولیتر از سرم کنترل مثبت و۲۰۰ میکرولیتر از سرم کنترل منفی را به چاهکهای مورد نظر اضافه نمایید .۳) ۲۰۰ میکرولیتر محلول رقیق کننده نمونه (Diluent Sample (را به همه چاهکها بجز چاهکهای بلانک ، کنترل مثبت و کنترل منفی اضافه نمایید .۴) ۱۰ میکرولیتر از سرمها را به چاهکهای مورد نظر اضافه نمایید .۵) چاهکها را به مدت ۱۵ ثانیه به ملایمت تکان دهید و درب چاهکها را با برچسب مخصوص پلیت پوشانده و سپس به مدت ۶۰ دقیقه در ۳۷ درجه سانتی گراد انکوبه نمایید .۶) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید (برای شستشو چنانچه دستگاه شستشوی اتوماتیک در دسترس نباشد آزمایش گردد . در هر دفعه شستشو حدود ۳۰۰ میکرولیتر محلول شستشو در هر چاهک ریخته و سپس چاهک ها را با وارونه کردن و تکاندن خالی نمایید و در انتهای می توان از سمپلر ۸ کاناله استفاده نمود ولی باید مواظب بود که محلول شستشو از یک چاهک به چاهک دیگر وارد نشود زیرا می تواند موجب ایجاد خطا در نتیجه عملیات شستشو چاهکها را در حالت وارونه و با ضربات ملایم بر روی یک پارچه یا کاغذ نمگیر بکوبید تا قطرات اضافی خارج شوند) .۷) ۱۰۰ میکرولیتر از محلول آنزیم کونژوگه آماده مصرف ً (روش آماده نمودن کونژوگه قبلا˝ گفته شده) را به کلیه چاهکها به استثناء چاهک بلانک اضافه نمایید .۸) پس از پوشاندن چاهکها توسط بر چسب مخصوص پلیت ، چاهکها را به مدت ۳۰ دقیقه در۳۷ درجه سانتی گراد انکوبه نمایید .۹) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید (همانند بند ۶) .۱۰) ۱۰۰ میکرولیتر محلول سوبسترا رنگزا به چاهک اضافه نمایید و بمدت ۱۵ دقیقه در دمای اتاق و تاریکی انکوبه نمایید .۱۱) با اضافه کردن ۱۰۰ میکرولیتر محلول متوقف کننده به هر چاهک، ادامه واکنشهای آنزیمی را متوقف نمایید . برای سنجش جذب نوری هر چاهک از دستگاه الایزاریدر با فیلتر nm450 استفاده نمایید و جذب نوری تمامی چاهکها را در مقابل بلانک قرائت نمایید (توصیه می شود از فیلتر nm630 بعنوان فیلتر رفرانس استفاده شود) .