محتویات کیت :۱) پلیت ۹۶ خانه حاوی چاهکهای پوشش داده شده با آنتی ژنهای ۱HSV و۲HSV) plate coated 1,2HSV).۲) محلول رقیق کننده نمونه (Diluent Sample ): یک ویال حاوی ۵۰ میلی لیتر محلول جهت رقیق کردن نمونه ها .۳) محلول اسی بافر (Buffer Assay ): یک ویال حاوی ۷/۵ میلی لیتر محلول IgG human Anti جهت مهار کردن روماتویید فاکتور و غلظتهای بالای IgG در نمونه
ها .۴) محلول آنزیم کنژوگه آماده مصرف (Conjugate Enzyme ): یک ویال حاوی ۱۲ میلی لیتر آنتی بادی ضد IgM انسانی متصل شده به آنزیم پراکسیداز .۵) سرم کنترل مثبت (Control Positive ): یک ویال حاوی ۲ میلی لیتر محلول بافری، دارای پروتئین به عنوان پایدار کننده و ۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ و سرم
انسانی غیر فعال شده، حاوی آنتی بادی IgM علیه ۱,۲HSV .۶) سرم کنترل منفی (Control Negative) : یک ویال حاوی ۲ میلی لیتر محلول دارای بافر فسفات و %۰/۰۵ کاتن به عنوان ماده محافظ و سرم انسانی منفی از نظر
آنتی بادیIgM علیه ۱,۲HSV .۷) محلول رنگزای یک مرحله ای (Substrate-Chromogen ): یک ویال حاوی ۱۲ میلی لیتر تترا متیل بنزیدین و آب اکسیژنه ( آماده برای مصرف ) .۸) محلول شستشو (Buffer Wash ): یک ویال حاوی ۵۰ میلی لیتر محلول شستشوی غلیظ (X20 (دارای محلول بافر فسفات و %۰/۰۵ تـوئین . جهـت تهیـه محلـول
شستشوی آماده مصرف ، مقدار مورد نیاز را با آب مقطر به نسبت ۱/۲۰ رقیق نمایید .۹) محلول متوقف کننده (Solution Stop ): یک ویال حاوی ۱۲ میلی لیتر اسید کلرید ریک ۱ نرمال .۱۰) برچسب مخصوص پلیت . شرایط نگهداری :۱) کیت را دریخچال بین دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی گراد نگهداری نمایید .۲) چاهکها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نمگیر نگهداری نمایید. پایداری پلیت پس از باز کردن کیسه آن ۴ ماه میباشد .۳) پایداری محتویات کیت تا پایان مدت انقضای نوشته شده بر روی هر یک از آنها می باشد . ۴) جهت تهیه محلول شستشوی آماده مصرف، مقدار لازم از محلول شستشوی غلیظ را به نسبت ۱ به ۲۰ با آب مقطر رقیق کنید (بطور مثال می توان ۵۰ میلی لیتر از
محلول شستشوی غلیظ را با آب مقطر به حجم یک لیتر رساند) . قابل ذکر است که پس از تهیه محلول شستشوی آماده مصرف می توان آنرا یک هفته در یخچال
نگهداری کرد و پس از یک هفته، دیگر قابل استفاده نمی باشد . مراحل انجام آزمایش :آماده سازی اولیه نمونه ها :
الف : نمونه ها را با کمک محلول رقیق کننده نمونه به نسبت ۱ به ۵۱ رقیق کنید (۱۰ میکرولیتر نمونه با ۵۰۰ میکرولیتر محلول رقیق کننده نمونه) .توجه : کنترلهای کیت آماده مصرف بوده و نیازی به رقیق سازی ندارند .ب : ۷۵ میکرولیتر از نمونه های رقیق شده را داخل لوله دیگری ریخته و ۷۵ میکرولیتر از محلول اسی بافر به آنها اضافه کنید. سپس به مدت ۱۰ دقیقه در دمای اتاق
نگهداری نمایید .روش انجام تست :۱) تعداد چاهکهای مورد نظر را انتخاب کرده و بقیه چاهکها را به همراه نمگیر درون کیسه مخصوص نگهداری پلیت قرار داده و درب آن را ببندید.۲) ۱۰۰ میکرولیتر از کنترل ها و ۱۰۰ میکرولیترازنمونه های آماده شده را طبق دستور زیر در چاهک ها بریزید :دو چاهک اول را برای بلانک و کنترل مثبت در نظر بگیرید.کنترل منفی را به صورت دوپلیکیت ریخته و سایر چاهک ها را برای نمونه ها استفاده کنید. پس از پوشاندن
چاهکها توسط برچسب مخصوص پلیت، چاهکها را برای مدت۳۰ دقیقه در دمای۳۷ درجه سانتی گراد قرار دهید .۳) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید. برای شستشو چنانچه دستگاه واشر اتوماتیک در دسترس نباشد می توان
از سمپلر ۸ کاناله و یا سرنگ استفاده نمود ولی باید مواظب بود که محلول شستشو از یک چاهک به چاهک دیگر وارد نشود. زیرا می تواند موجب ایجاد خطا در نتیجه آزمایش گردد. در هر دفعه شستشو حدود ۳۰۰ میکرولیتر محلول شستشو در هر چاهک ریخته و سپس چاهک ها را با وارونه کردن و تکاندن خالی نمایید و در انتهای عملیات شستشو، چاهکها را در حالت وارونه و با ضربات ملایم بر روی یک پارچه یا کاغذ نمگیر بکوبید تا قطرات اضافی خارج شوند .۴)۱۰۰ میکرولیتر از محلول آنزیم کنژوگه آماده مصرف را به چاهکها به استثنای چاهک بلانک بریزید . پس از پوشاندن چاهکها توسط برچسب مخصوص پلیت ، چاهکها
را به مدت ۳۰ دقیقه در دمای۳۷ درجه سانتی گراد قرار دهید .۵) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید. (همانند بند ۳).۶) ۱۰۰میکرولیتر محلول رنگزا (Substrate-Chromogen (به همه چاهکها اضافه نمایید . چاهکها را به مدت ۱۵ دقیقه در درجه حرارت اتاق و در تاریکی قرار دهید .۷) با اضافه کردن ۱۰۰ میکرولیتر محلول متوقف کننده (Solution Stop (به هر چاهک، واکنشهای آنزیمی را متوقف نمایید . برای سنجش جذب نوری هر چاهک از
دستگاه الایزاریدر با فیلتر nm 450 استفاده نموده و جذب نوری چاهکها را قرائت نمایید. توصیه میشود از فیلتر nm 630 به عنوان فیلتر رفرانس استفاده گردد.
محصولات مرتبط
کیت AFP پیشتازطب ۹۶تستی
امتیاز 0 از 5
کیت PTH مونوکیت ۹۶تستی
امتیاز 0 از 5
نقد و بررسیها
Clear filtersهنوز بررسیای ثبت نشده است.