محتویات کیت :۱) پلیت ۹۶ خانه حاوی چاهکهای پوشش داده شده با آنتی بادی ضد (۴T) Plate Coated 4T-Anti .۲) محلول آنزیم کنژوگه (Conjugate Enzyme 4T (: یک ویال حاوی ۶ میلی لیتر (آماده مصرف) .۳) اسی بافر (buffer Assay (: یک ویال حاوی ۶ میلی لیتر (آماده مصرف) .۴) سری استانداردها (Set Standards (: 6 ویال استاندارد شامل غلظتهای ،۰ ۲ ، ۴ ، ۸ ، ۱۲ , ۲۰ dl/g از ۴T) استاندارد صفر حاوی ۱ میلی لیتر و سایر استانداردها
حاوی ۰/۵ میلی لیتر می باشند) .۵) سرم کنترل : یک ویال حاوی ۰/۵ میلی لیتر سرم کنترل با غلظت مشخص درج شده بر روی برچسب ویال .۶) محلول شستشو (Solution Wash (: یک ویال حاوی ۵۰ میلی لیتر محلول شستشوی غلیظ (X 20 (. جهت تهیه محلول شستشوی آماده مصرف مقدار لازم از
محلول شستشوی غلیظ را به نسبت ۱/۲۰ با آب مقطر رقیق کنید .۷) محلول رنگزای یک مرحله ای(Substrate-Chromogen (: یک ویال حاوی ۱۲ میلی لیتر (آماده مصرف) .۸) محلول متوقف کننده (Solution Stop (: یک ویال حاوی ۱۲میلی لیتر اسید کلریدریک ۱ نرمال .۹) برچسب مخصوص پلیت . شرایط نگهداری :۱) کیت را در یخچال بین دمای ۲ تا ۸ درجه سانتی گراد نگهداری نمایید .۲) چاهکها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نمگیر نگهداری نمایید .۳) پایداری محتویات کیت تا پایان مدت انقضای یاد شده بر روی هر یک از آنها می باشد .۴) محلول شستشوی آماده مصرف که به نسبت ۱/۲۰ با آب مقطر رقیق شده باشد به مدت یک هفته در شرایط -۸ ۲ درجه سانتی گراد قابل نگهداری و مصرف می باشد. مراحل انجام آزمایش :۱) تعداد چاهکهای مورد نظر را انتخاب نموده و باقی چاهکها را به همراه نمگیر درون کیسه مخصوص نگهداری پلیت قرار داده و درب آن را ببندید.۲) ۲۵ میکرولیتر از هر استاندارد، سرم کنترل و نمونه را به داخل هر چاهک بریزید . پیشنهاد می گردد که از استانداردها و نمونه ها بصورت داپلیکیت استفاده شود بدین
معنی که هر استاندارد و نمونه را در دو چاهک بریزید و در انتها از میانگین جذب نوری آنها برای محاسبه نتایج استفاده کنید ، سپس ۵۰ میکرولیتر اسی بافر
(buffer Assay (و در پی آن ۵۰ میکرولیتر آنزیم کنژوگه را در داخل چاهک ها ریخته و برای مدت ۱۵ ثانیه پلیت را تکان دهید تا محتویات چاهکها خوب مخلوط
شوند و آنگاه درب چاهکها را با برچسب مخصوص پلیت پوشانده و چاهکها را به مدت ۱ ساعت در درجه حرارت اتاق (-۲۸ ۲۲ درجه سانتی گراد) و در تاریکی انکوبه
نمایید .۳) محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید (برای شستشو می توان از سمپلر ۸ کاناله استفاده نمود ولی باید مواظب
بود که محلول شستشو از یک چاهک به چاهک دیگر وارد نشود زیرا می تواند موجب ایجاد خطا در نتیجه آزمایش گردد، در هر دفعه شستشو حدود ۳۰۰ میکرولیتر
محلول شستشو در هر چاهک ریخته و سپس چاهک ها را با وارونه کردن و تکاندن خالی نمایید و در انتهای عملیات شستشو چاهک ها را در حالت وارونه و با ضربات
ملایم بر روی یک پارچه یا کاغذ نمگیر بزنید تا قطرات اضافی خارج شوند .۴) ۱۰۰ میکرولیتر محلول رنگزا (Substrate - Chromogen (به هر چاهک اضافه نمایید و چاهکها را به مدت ۱۵ دقیقه در درجه حرارت اتاق و در تاریکی انکوبه
نمایید .۵) با اضافه کردن ۱۰۰ میکرولیتر محلول متوقف کننده (Solution Stop (به هر چاهک ادامه واکنشهای آنزیمی را متوقف نمایید . برای سنجش جذب نوری هر
چاهک از دستگاه الایزاریدر با فیلتر nm 450 استفاده نمایید ( توصیه میشود از فیلتر nm 630 به عنوان فیلتر رفرانس استفاده گردد) .
محصولات مرتبط
کیت PTH مونوکیت ۹۶تستی
امتیاز 0 از 5
نقد و بررسیها
Clear filtersهنوز بررسیای ثبت نشده است.