کیت Vitamin-D پیشتازطب ۹۶تستی

کیت Vitamin-D پیشتازطب ۹۶تستی برای سنجش ۲۵ OH ویتامین D به روش  ELISA استفاده میشود. این کیت حاوی تجهیزات مختلفی است که به منظور این سنجش استفاده میشود. در ادامه به بررسی محتویات این کیت میپردازیم.

محتویات کیت Vitamin-D پیشتازطب ۹۶تستی

• پلیت حاوی چاهکهای پوشش داده شده با آنتی بادی ضد ویتامین D) Plate Coated D Vitamin-Anti)
•  محلول اسی بافر (Buffer Assay): ویال حاوی محلول بافری آماده مصرف.
•  محلول بافر استخراج (Buffer Extraction ): ویال حاوی محلول استخراج ویتامین D از پروتئین متصل شونده به آن (Protein Binding D Vitamin) تذکر مهم: به دلیل وجود مواد فرار در این محلول، درب ویال را بلافاصله پس از برداشت محلول مورد نیاز محکم ببندید .
•  محلول کنژوگه غلیظ (D Vitamin OH25- Biotinylated ): ویال حاوی محلول ویتامین D متصل به بیوتین (بصورت x 20).
•  محلول رقیق کننده کنژوگه ( Diluent Conjugate ): ویال حاوی محلول جهت رقیق کردن کونژوگه .
•  سری استانداردها (Set Standards ): شامل ۶ ویال استاندارد با غلظتهای ،۰ ،۵ ،۱۰ ۳۰ ، ۶۰ و ۱۲۰ ml/ng از D Vitamin OH25- کالیبره شده مطابق پروتکل برنامه استاندارد سازی ویتامین D ) VDSP ) با استاندارد مرجع ۹۷۲ ( SRM ( NIST .
•  سرم کنترل (Serum Controls ): دو ویال حاوی سرم کنترل با غلظتهای مشخص شده بر روی بر چسب ویال .
• محلول شستشو (Solution Wash ): ویال حاوی محلول شستشوی غلیظ (X20 ). جهت تهیه محلول شستشوی آماده مصرف، مقدار مورد نیاز را با آب مقطر به نسبت ۱/۲۰ رقیق نمایید .
•  محلول رنگزای یک مرحله ای (Substrate-Chromogen ): ویال حاوی محلول آماده مصرف .

مراحل استفاده از کیت Vitamin-D پیشتازطب ۹۶تستی

•  تعداد چاهکهای مورد نظر را انتخاب نموده و سایر چاهکها را به همراه نمگیر درون کیسه مخصوص نگهداری پلیت قرار داده و درب آن را ببندید .
• ۲۰ میکرولیتر از هر استاندارد، سرم کنترل و نمونه را به داخل هر چاهک بریزید، پیشنهاد می گردد که از استانداردها و نمونه ها بصورت داپلیکیت استفاده شود بدین معنی که هر استاندارد و نمونه را در دو چاهک بریزید و در انتها از میانگین جذب نوری آنها برای محاسبه نتایج استفاده کنید .
• ۱۰۰ میکرولیتر از محلول واکنش (buffer Reaction (را به داخل هر چاهک بریزید. جهت تهیه محلول بافر واکنش (buffer Reaction (می بایست به ازای هر چاهک به میزان ۷۵ میکرولیتر از بافر استخراج را با ۷۵ میکرولیتر محلول اسی بافر در لوله آزمایش بخوبی با هم مخلوط کنید .
•  پلیت را برای مدت ۲ دقیقه به آرامی shake کنید تا محتویات چاهکها خوب مخلوط شوند و سپس درب چاهکها را با برچسب مخصوص پلیت پوشانده و چاهکها را به مدت ۴۵ دقیقه در انکوباتور ۳۷ درجه سانتی گراد انکوبه نمایید .
• تذکر مهم: عمل تکان دادن پلیت را تا مخلوط شدن کامل و یکنواخت شدن رنگ محتویات چاهک ها ادامه دهید. جهت شیکینگ پلیت می توان از دستگاه شیکر پلیت با دور RPM 500 به مدت ۲ دقیقه استفاده نمود .
•  پس از پایان انکوباسیون محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید (برای شستشو میتوان از سمپلر ۸ کاناله استفاده نمود ولی باید مواظب بود که محلول شستشو از یک چاهک به چاهک دیگر وارد نشود زیرا می تواند موجب ایجاد خطا در نتیجه آزمایش گردد، در هر دفعه شستشو حدود ۳۰۰ میکرولیتر محلول شستشو در هر چاهک ریخته و سپس چاهک ها را با وارونه کردن و تکاندن خالی نمایید و از هر گونه time Soaking در مراحل شستشو پرهیز شود . در انتهای عملیات شستشو چاهکها را در حالت وارونه و با ضربات ملایم بر روی یک پارچه یا کاغذ نمگیر بکوبید تا قطرات اضافی خارج شوند .
• ۱۰۰ میکرولیتر از محلول کونژوگه رقیق شده را به داخل هر چاهک بریزید . جهت تهیه این محلول می بایست به ازای هر استریپ به میزان ۹۵۰ میکرولیتر از محلول رقیق کننده کونژوگه را با ۵۰ میکرولیتر محلول کونژوگه غلیظ در لوله آزمایش بخوبی با هم مخلوط کنید .توصیه می شود جهت جلوگیری از افت D.O؛ محلول کونژوگه آماده مصرف را پس از اتمام انکوباسیون اول تهیه نمایید.
•  درب چاهکها را با برچسب مخصوص پلیت پوشانده و چاهکها را به مدت ۱۵ دقیقه در انکوباتور ۳۷ درجه سانتی گراد انکوبه نمایید .
•  پس از پایان انکوباسیون محتویات چاهکها را خالی کرده و چاهکها را ۵ بار با محلول شستشوی آماده مصرف بشویید (برای شستشو میتوان از سمپلر ۸ کاناله استفاده نمود ولی باید مواظب بود که محلول شستشو از یک چاهک به چاهک دیگر وارد نشود زیرا می تواند موجب ایجاد خطا در نتیجه آزمایش گردد، در هر دفعه شستشو حدود ۳۰۰ میکرولیتر محلول شستشو در هر چاهک ریخته و سپس چاهک ها را با وارونه کردن و تکاندن خالی نمایید و از هر گونه time Soaking در مراحل شستشو پرهیز شود . در انتهای عملیات شستشو چاهکها را در حالت وارونه و با ضربات ملایم بر روی یک پارچه یا کاغذ نمگیر بکوبید تا قطرات اضافی خارج شوند . ۱۰۰ میکرولیتر محلول رنگزا (Substrate-Chromogen (به هر چاهک اضافه نمایید .
•  چاهکها را به مدت ۱۵ دقیقه در درجه حرارت اتاق و در تاریکی انکوبه نمایید .
•  با اضافه کردن ۱۰۰ میکرولیتر محلول متوقف کننده (Solution Stop (به هر چاهک ادامه واکنشهای آنزیمی را متوقف نمایید. برای سنجش جذب نوری هر چاهک از دستگاه الایزاریدر با فیلتر nm 450 استفاده نمایید . توصیه میشود از فیلتر nm 630 به عنوان فیلتر رفرانس استفاده گردد .

شرایط نگهداری

• کیت را در یخچال بین دمای ۲ تا ۸ درجه سانتیگراد نگهداری نمایید .
• چاهکها را در کیسه مخصوص پلیت همراه با نمگیر نگهداری نمایید .
• پایداری محتویات کیت تا پایان مدت انقضای نوشته شده بر روی هر یک از آنها می باشد .
• محلول شستشوی آماده مصرف که به نسبت ۱/۲۰ با آب مقطر رقیق شده باشد به مدت یک هفته در شرایط ۸ - ۲ درجه سانتی گراد قابل نگهداری و مصرف می باشد.

برای استفاده از کیت Vitamin-D پیشتازطب ۹۶تستی نیاز است تا نسبت به نکات زیر دقت داشته باشید.

• محتویات کیت Vitamin-D پیشتازطب ۹۶تستی فقط برای مصرف در همین کیت می باشد .
• پاز مخلوط کردن محتویات کیتها با شماره ساختهای مختلف جداً خودداری نمایید .
• پکلیه مواد موجود در کیت که منشاء سرمی دارند از نظر وجود HBsAg و آنتی بادی های ضد HCV و HIV کنترل گردیده اند و فاقد این عوامل می باشند ، جهت احتیاط بهتر است کاربرانی که با کیت کار می کنند از تماس مستقیم با مواد بپرهیزند .

میتوانید کیت Vitamin-D پیشتازطب ۹۶تستی با بهترین قیمت از مجموعه نیاز طب سلامت تهیه کنید. علاوه بر این محصول، ما در مجموعه نیاز طب سلامت، تجهیزات آزمایشگاهی دیگری هم موجود داریم که با مراجعه به بخش "تجهیزات آزمایشگاهی"، میتوانید آنها را بررسی کنید و محصول مورد نظر خود را با بهترین قیمت تهیه کنید.ما در پیج اینستاگرام نیاز طب، تجهیزات آزمایشگاهی مختلفی را مورد بررسی قرار میدهیم. با دنبال کردن این پیج میتوانید اطلاعات خوبی در زمینه تجهیزات آزمایشگاهی کسب کنید.